Obtainment of embryogenic cell suspensions from scalps of the banana CIEN-BTA-03 (Musa sp., AAAA) and regeneration of the plants

The purposes of this work were to obtain embryogenic cell suspensions (ECS) from scalps and to regenerate plants of the banana CIEN-BTA-03. Shoot apexes were grown in the scalp-induction medium of Murashige and Skoog plus BA and IAA, following four diverse treatments. The first two, ME22 and ME25, were solid media supplemented with (mg L-1) 22.7 BA plus 0.192 IAA, and 25 BA plus 0.217 IAA, respectively, all containing 1.8 g L-1 of phytagel, and subcultures were performed monthly and bimonthly over 16 months. The other two treatments, IT22 and IT25, resembled ME22 and ME25 but consisted in temporary immersion for four months without subcultures, followed by two months in solid media. The scalps were grown in callus-induction medium and embryogenic calluses were obtained with abundant somatic embryos, especially in scalps from IT25. About 10 to 15 embryos from each were transferred to 5 ml of multiplication medium to initiate the ECS. The scalps obtained from the IT25 treatment were the most successful as they led to ECS with high embryogenic capability. In addition, IT25 decreased the timespan required for the production of scalps. The obtained ECS gave rise to secondary somatic embryos. It showed a high multiplication index, as well as numerous mature somatic embryos, and good conversion of embryos and plant regeneration.

Genetic stability of Solanum tuberosum L. CV. Désirée plantlets obtained from embryogenic cell suspension cultures

Se analizó la estabilidad genética de plántulas de Solanum tuberosum L. cv. Désirée obtenidas a partir del cultivo de células embriogénicas en suspensión, las que fueron inducidas a partir de callos mixoploides con abundantes células binucleadas. Las plantas regeneradas a partir de estos tejidos presentaron un número euploide de cromosomas (2n=4x=48). Este resultado indica que en este sistema las células euploides fueron seleccionadas para seguir el proceso de embryogenesis somática y regeneración de plantas. La estabilidad genotípica de las plantas regeneradas fue evaluada mediante marcadores RAPD. Los resultados indican que las nuevas poblaciones de plantas son altamente homogéneas.

Micropropagación y organogenesis de aster ericoides cultivar Monte Cassino / Micropropagation and organogenesis of the Monte Cassino cultivar of aster ericoides

La micropropagación y la organogénesis de Aster ericoides cultivar Monte Cassino fueron establecidas a partir del cultivo de yemas, microesquejes y hojas obtenidos de plantas de 2 meses de edad mantenidas en condiciones de vivero. Las yemas y microesquejes fueron cultivados en medios MS suplementados con 1mgúl-¹ de cinetina (K) y 0,5mgúl-¹ de ácido indolacético (AIA), obteniendo a los 2 meses de cultivo un promedio de 4,68 brotes a partir del cultivo de microesquejes y de 2,64 brotes a partir del cultivo de yemas. El proceso de organogénesis fue inducido utilizando explantes de hojas de plantas cultivadas in vitro en medios MS suplementados con benciladenina (BA) y ácido naftaleno-acético (ANA). El proceso de organogénesis directa fue observado en medio MS suplementado con 0,5mgúl-¹ BA y 0,5mgúl-¹ ANA, obteniendo un número promedio de 1 brote por explante, a los 30-45 días de cultivo. La organogénesis indirecta se observó a partir de callos cultivados en medios suplementados con las mayores concentraciones de BA, obteniéndose el mayor índice de formación de brotes (1,16) en el medio suplementado con 5mgúl-¹ BA y 0,5mgúl-¹ ANA, a los 6 meses de cultivo. El mayor porcentaje de aclimatación (80 por ciento) fue observado en plantas obtenidas a partir del proceso de organogénesis en sustratos de tierra negra. La micropropagación a través del cultivo de microesquejes resultó el sistema de propagación in vitro más eficiente para Aster ericoides cultivar Monte Cassino.

Optimizacion del proceso de embriogenesis somatica en variedades venezolanas de caña de azucar / Improvement of somatic embryogenesis in sugarcane venezuelan cultivars

En muchas variedades de caña de azúcar, se induce un alto porcentaje de callo embriogénico (70 %), al cultivar ôin vitroö explantes de hojas jóvenes en un medio constituido por las sales de Murashige y Skoog ,y 13 M de ácido 2,4 diclorofenoxiacético (2,4-D). Sin embargo, en las variedades venezolanas V78-1 y V75-6 el porcentaje de callo embriogénico producido en estas condiciones,es menor (30 %). Con el fin de optimizar el proceso de embriogénesis somática en estas dos variedades, se indujo la formación de callo embriogénico utilizando diferentes medios: Medio C3 (13 M de 2,4-D); Medio C7 (31.5 M de 2,4-D); Medio Cd (30 M de Dicamba) y medio C5BA (22.5 M de 2,4-D y 22.2 M de Benciladenina). Después de 45 días, en el medio Cd se observó el mayor porcentaje de calloembriogénico para ambas variedades (90 %). La capacidad morfogenética de estos callos, quedó evidenciada al ser transferidos al medio de regeneración (sin hormonas), donde a los cuatro días ya se observaba la formación de plantas a partir de los embriones somáticos obtenidos en el medio Cd, mientras que los embriones provenientes de los medios C3, C7 y C5BA, comenzaban a desarrollar plantas a los ocho días.

Estudios anatomicos y morfologicos de la iniciacion de embriones somaticos obtenidos a partir de apices meristematicos de Musa sp / Anatomic and morphological studies on the initiation of somatic embryos obtained from meristematic apexes of Musa sp

El origen de embriones somáticos obtenidos de ápices meristemáticos del clon de Musa (AAA) 'Gran enano', fue analizado mediante estudios histológicos y morfológicos durante las diferentes fases de desarrollo del proceso. La investigación reveló que los embriones somáticos se originaron directamente de células del parénquima perivascular de las hojas. Secciones histológicas de los embriones globulares mostraron una disposición radial de las células y la presencia de una epidermis que rodea completamente al embrión. Con la adición de citocinina (Z o BA), algunos embriones permanecieron en estado globular, con ligeros signos de agrandamiento sin un posterior desarrollo de la invaginación. Otros lograron alcanzar el estado de embrión globular con invaginación; otros el estado alargado, con una clara diferenciación entre el extremo apical y basal y con tejidos fotosintéticamente activos, pero no se logró la regeneración de plantas completas. Tratamientos adicionales, como es el someter a los embriones a un "shock osmótico" o la adición de GA3, fueron también probados sin éxito. Al presente, no tenemos una explicación para la no regeneración de las plantas, por lo tanto sugerimos que se deben realizar experimentos adicionales, como lo son estudios histológicos y bioquímicos en estados tempranos, intermedios y tardíos de la embriogénesis somática, para tratar de entender en que momento y porque, son interrumpidos los procesos fisiológicos normales del desarrollo del embrión.